B27無血清培養(yǎng)基專門用來在無血清條件下培養(yǎng)特殊類型的細胞或進行特殊應(yīng)用。
B27無血清培養(yǎng)基的使用展現(xiàn)了一種重要的培養(yǎng)方法：允許細胞培養(yǎng)
在一套限定條件下進行，盡可能避免受到干擾參數(shù)的影響。
細胞適應(yīng)B27無血清培養(yǎng)基的方法
1.直接適應(yīng)——細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到B27無血清培養(yǎng)基中。
一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)B27無血清培養(yǎng)基。對于直接適應(yīng)，接種細胞密度應(yīng)該:2.5×105~3.5×105細胞/ml。當細胞密度達到1×106~3×106細胞/ml時，傳代培養(yǎng)細胞。當細胞密度在培養(yǎng)4到7天后達到2×106~4×106細胞/ml時，細胞*適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基。每隔3~5天，當細胞密度達到1×106~3×106細胞/ml，細胞活率在90％時，貯備的適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
2.連續(xù)適應(yīng)——分好幾步把細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到B27無血清培養(yǎng)基中，與直接適應(yīng)相比較，連續(xù)適應(yīng)趨向?qū)τ诩毎訙睾鸵恍?/div>
（1）以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養(yǎng)物到80%有血清培養(yǎng)基：30％sfm混合培養(yǎng)基中，傳代培養(yǎng)。
（2）當細胞密度>5×105細胞/ml時，以2×105到3×105細胞/ml細胞密度，在有血清培養(yǎng)基：sfm為50∶50的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
（3）以2×106到3×106細胞/ml細胞密度，25％有血清培養(yǎng)基和75%sfm中傳代培養(yǎng)。
（4）當細胞密度達到1×106到3×106細胞/ml（接種后4到6天），在100％sfm培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
（5）每隔3到5天，當細胞密度達到1×106到3×106細胞/ml，細胞活率在90％時，貯備的適應(yīng)了B27無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
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